Диагностика туберкулеза методом пцр

Возбудителем туберкулеза является микобактерия под названием туберкулезная палочка или палочка Коха. Попадая в организм человека, она может длительное время себя никак не проявлять. Но со временем, как только возникнут благоприятные условия, бактерия может вызвать туберкулез легких или других органов.

Для успешной борьбы с этим заболеванием очень важно диагностировать его на ранних стадиях. Анализ крови на туберкулез методом ПЦР является самым эффективным и быстрым способом диагностики туберкулеза. На его проведение достаточно четыре часа. Он более удобен, чем другие методы, у него меньше противопоказаний и почти стопроцентная достоверность.

Что такое анализ крови методом ПЦР?

На сегодняшний день анализ ПЦР является одним из новейших методов диагностики различных заболеваний организма. Для выявления туберкулеза этот способ самый эффективный, по сравнению с другими способами, применяемыми до сих пор. Метод был открыт в 1983 году известным химиком К.Мюллисом, через десять лет получившим за него Нобелевскую премию.

В основе этого способа применяется полимеразная цепная реакция, позволяющая определить не только наличие возбудителя в крови, но и его вид. С этой целью при помощи ПЦР метода, выявляется часть ДНК возбудителя и проводится его идентификация. Даже если в крови находится несколько разных возбудителей, эта методика позволяет обнаружить их всех.

Анализ крови ПЦР на туберкулез назначают пациенту, когда есть подозрение на наличие туберкулезной палочки, но другими методами она не обнаруживается.

При желании каждый может сдать этот анализ самостоятельно, обратившись в клинику, где его проводят, например в ИНВИТРО. Это одна из крупнейших частных компаний, содержащих медицинские лаборатории во многих странах.

Эффективен ли данный метод при диагностике туберкулеза?

В настоящее время нет более точного анализа для выявления палочки Коха в организме пациента. Общий анализ крови эффективен, но позволяет получить положительный или отрицательный результат только спустя достаточно длительное время. Для этого делается посев исследуемого материала на питательную среду и лишь через несколько недель становится видно, идет ли размножение бактерии.

Метод ПЦР позволяет выявить ДНК бактерии за считанные часы, что является большим плюсом для диагностики. Кроме того, анализ позволяет точно идентифицировать бактерию, даже если ее в крови очень мало.

Противопоказания к методу

Данный метод исследования почти не имеет противопоказаний. Ввиду того, что используется кровь, состояние пациента не имеет значения. Наличие простудных заболеваний не влияет на результат анализа.

Не рекомендуется его проводить после прививки, а также после недавно проведенного лечения. Это объясняется тем, что организм еще не очистился, и остатки бактерий могут повлиять на результат.

Преимущества анализа

Анализ крови ПЦР на туберкулез имеет ряд преимуществ перед другими методами исследования, такими как реакция Манту или рентген. Среди них можно выделить следующие качества:

1. Быстрота выполнения. По сравнению с другими анализами ПЦР делается в течение нескольких часов.
2. Для проведения процедуры можно использовать не только кровь, но и другие биологические выделения организма.
3. Процедура не имеет противопоказаний, ее можно проводить не только взрослым, но и детям. Также подходит беременным женщинам без вреда для их здоровья.
4. Метод позволяет выявить заражение крови бактериями на самых первых стадиях, когда еще нет внешних признаков заболевания.
5. Методика позволяет выявить возбудителя при самых малых количествах бактерий в материале.
6. Дает хороший эффект при исследовании больного, заразившегося повторно.
7. Анализ можно брать независимо от того, как себя чувствует пациент. Например, реакция Манту делается, если у больного нет простудных заболеваний и повышения температуры. В данном случае таких ограничений нет.

Как видно из предоставленного списка, этот метод диагностики гораздо предпочтительнее, чем другие. Он абсолютно безвреден для пациентов, страдающих аллергическими реакциями. Его можно успешно использовать взрослым и детям. Методика позволяет сэкономить время на диагностику и быстрее начать лечение.

Метод также удобен для людей из провинции, где нет соответствующих лабораторий. Им не приходится приезжать несколько раз в клинику, достаточно одного дня, чтобы получить результат анализов и назначение лечения от врача.

Недостатки анализа крови ПЦР

Кроме преимуществ у этого метода есть ряд недостатков, которые могут быть препятствием для проведения анализа ПЦР:

1. Относительная дороговизна процедуры. Для проведения такого анализа необходимо дорогостоящее оборудование и не каждая клиника может себе это позволить. Оно есть в крупных лабораториях частных компаний. Цены там, как правило, всегда высокие.
2. Анализ дает правильный результат лишь в том случае, если материал для исследования правильно подобран. К примеру, при туберкулезе мочеполовой системы, исследование крови наличие заболевания не покажет. В этом случае нужно собрать мочу или выделения из мочеполовых органов.
3. Метод не всегда дает точного результата у детей. Это объясняется влиянием прививок. Например, после прививки БЦЖ делать этот анализ не рекомендуется.
4. Есть вероятность получения ложноположительного или ложноотрицательного результата. Что это такое? Способ обладает очень высокой чувствительностью. При сборе материала должна соблюдаться повышенная стерильность. В случае если в материал попадет самое малое количество посторонних бактерий, анализ будет испорчен, результат исказится.

Несмотря на недостатки, метод достаточно широко используется. Например, в тех случаях, когда необходимо срочно определить заболевание у пациента. Его могут назначить беременным при подозрении на инфекцию, способную угрожать ребенку или матери. Иногда назначают детям перед принятием в детский сад. Но это по желанию родителей.

Подготовка к процедуре

Перед взятием анализа пациенту необходимо провести подготовительные мероприятия. Они зависят от того, какой материал будет сдаваться:

1. Если необходимо сдать кровь, должна быть подготовлена стерильная пробирка. В нее добавляется антикоагулянт – специальный раствор, препятствующий свертыванию крови. В него помещается собранный материал и осторожно смешивается. Кровь собирают одноразовым шприцем из вены.
2. Процедура проводится утром натощак. Хранится кровь в холодильнике не более пяти часов. Если пренебречь этим правилом, результаты анализа могут быть неточными.
3. За неделю до сдачи биоматериала следует прекратить прием любых лекарств.
4. Нельзя сдавать кровь после приема алкогольных напитков.
5. При наличии хронических инфекционных или воспалительных заболеваний процедура переносится до тех пор, пока человек полностью не выздоровеет.

Обязательно во время процедуры необходимо соблюдать по возможности максимальную стерильность. Поэтому важно сдавать анализы только в проверенных клиниках под руководством опытного специалиста. Следует помнить, что минимальное попадание посторонних микроорганизмов может дать неправильный результат. Во избежание этого, доктор может назначить повторное исследование.

Как производится забор крови методом ПЦР

Чтобы сдать кровь на анализ, больной должен не принимать пищу более шести часов. Лучше всего проходить процедуру утром натощак. Кровь забирается из локтевой вены через одноразовую иглу сразу в стерильную пробирку. Туда же вводится антикоагулянт, чтобы кровь не свернулась. Смешивать содержимое пробирки следует осторожно, не допуская резких движений.

Если кровь была взята вне лаборатории, ее надо немедленно доставить лаборанту. Для проведения анализа на туберкулез она должна храниться не более пяти часов. По истечении этого времени результат может быть неточным. Взятие материала вне лаборатории допускается только в том случае, если пациент не может приехать в больницу по состоянию здоровья. Например, он лежачий, и нет возможности нанять соответствующий транспорт.

Расшифровка результатов

Результат ПЦР может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный означает присутствие бактерии в организме. Отрицательный свидетельствует о том, что она отсутствует. Хотя не всегда положительный результат говорит о туберкулезе. Он может быть ошибочным, поэтому для подтверждения диагноза требуется пройти дополнительные диагностические тесты.

Вся остальная информация сложна для восприятия больного, и ею занимается специалист. При положительном результате врач назначает необходимое лечение.

Стоимость анализов в разных центрах

Цена процедуры может отличаться в зависимости от медицинского центра, где она проводится. Подробнее в нижерасположенной таблице.

Метод ПЦР для анализа на туберкулез сравнительно новый, и многие пациенты с ним еще не знакомы. В большинстве случаев больные предпочитают Манту и флюорографию. Но, как показывает практика, этот способ диагностики более эффективный и в конечном итоге полностью себя окупает.

Отсутствие противопоказаний и быстрота выполнения делает его привлекательным по сравнению с другими анализами. Медицина не стоит на месте и этот метод с каждым разом усовершенствуется и становится все более надежным.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это молекулярно-генетическое исследование биологического материала, которое позволяет выявить ДНК возбудителя в образце.

ПЦР диагностика туберкулеза является одним из самых точных методов верификации заболевания. С его помощью можно не только выявить наличие в организме возбудителя, но и определить его типовую принадлежность. Также метод ценен для определения латентных форм болезни.

Данная статья содержит информацию о сути методики, показаниях, подготовке к исследованию и расшифровке результатов.

Показания для диагностики

Несмотря на свои очевидные преимущества (быстрота выполнения, точность) ПЦР анализ крови и других биологических жидкостей не является скрининговым методом. Причина этого – высокая стоимость исследования. Кроме того, некоторые лаборатории не имеют необходимых для проведения теста реактивов и оборудования. Поэтому проводить ПЦР на туберкулез вместо пробы Манту или рентгенографии органов грудной клетки нецелесообразно.

Выделяют следующие показания для проведения исследования:

• длительный контакт с лицом, у которого достоверно выявлен туберкулез;
• беременность;
• аллергические реакции на туберкулин;
• ВИЧ-инфекция или СПИД;
• невозможность верифицировать заболевание другими лабораторными способами (при наличии клинических признаков туберкулеза).

Помимо прочего, исследование помогает дифференцировать туберкулезные и нетуберкулезные микобактерии. Также ПЦР определяет устойчивость возбудителя болезни к различным лекарственным препаратам. В процессе исследования оценивается структура ДНК, определяются мутации, ответственные за возникновение резистентности к лечению.

Материалы, используемые для исследования

Для ПЦР диагностики могут быть использованы любые биологические жидкости.

Чаще всего исследуются:

• кровь;
• слюна;
• мокрота;
• моча;
• спинномозговая жидкость;
• выделения из половых путей;
• промывные воды желудка или бронхов.

Выбор материала зависит от формы заболевания. При подозрении на легочный туберкулез проводится ПЦР-исследование мокроты или крови. Плевральный выпот используют для установления микобактериальной природы плевритов. Для верификации менингита, вызванного палочками Коха, применяют исследование спинномозговой жидкости. При наличии признаков поражения мочеполовой системы проводится ПЦР мочи на туберкулез.

Объем биологической жидкости зависит от ее вида. Крови требуется 8-10 мл. Для исследования мочи необходимо 50-70 мл жидкости. Для анализа мокроты берется от 10 до 20 мл бронхиальных выделений.

Проблемой ПЦР диагностики является большое количество ложноположительных результатов. Это связано с нарушением правил сбора материала и доставки его в лабораторию. Микобактерии распространены повсеместно, поэтому при нарушении санитарных норм возможна контаминация (смешение, загрязнение) образцов флоры.

Материал должен собираться в стерильную тару. Делать это нужно в специальном помещении. Важно исключить контакт контейнера или пробирки с окружающими предметами. Сразу после завершения сбора материала необходимо герметично закрыть емкость и поместить ее в холодильную установку.

Транспортировка образцов осуществляется в течение нескольких часов. Для улучшения условий хранения и доставки допустимо использование консервантов и антикоагулянтов (для крови).

Подготовка пациента

Для получения достоверных данных важна правильная подготовка к исследованию. Анализ крови сдается утром, натощак. Моча также должна быть собрана утром, в стерильный контейнер, после гигиенических процедур.

Для проведения исследования мокроты необходимо достаточное ее количество. Поэтому допустимо назначение отхаркивающих препаратов.

Перед исследованием выделений из половых путей необходимо несколько дней воздерживаться от половых контактов. Недопустимо проведение спринцевания в этот период.

Имеют значение и медикаменты, которые употребляет пациент. Некоторые из них могут исказить результаты анализа. Перед проведением исследования необходимо обсудить правила приема и режим дозирования лекарств с врачом.

Расшифровка результатов теста

Расшифровка результатов ПЦР исследования осуществляется в течение нескольких часов. Обнаружение ДНК возбудителя в материале говорит о наличии инфекции в организме. Однако судить об активности процесса, исходя из этих данных, нельзя (исключение составляет проведение количественной ПЦР).

Если следы микобактерий в образце не обнаруживаются, можно говорить об отсутствии инфекции. В отличии от положительного, отрицательный результат следует считать надежным.

ПЦР анализ расшифровывается автоматически. Это стало возможным благодаря введению в практику ПЦР-анализаторов. С их помощью проводится большое количество исследований в короткие сроки.

Полезное видео

ПЦР: что это такое и как устроено в этом видео:

Заключение

На сегодняшний день ПЦР является самым достоверным способом установления инфицирования туберкулезом. Исследование помогает не только выявить заболевание и провести дифференциальную диагностику, но и подобрать эффективную схему лечения. Недостаточная распространенность метода объясняется его дороговизной, необходимостью специфического оснащения и высокой долей ложноположительных результатов.

Анализ крови по ПЦР-методике на туберкулез – современная диагностика выявления абсолютно всех штаммов инфекционного заболевания и их очагов в биоматериале организма человека.

Анализ крови и мочи методикой ПЦР на туберкулез – является фактически обязательным исследованием скрытого проистекания заболевания, передающегося не только воздушно-капельным путем, но и посредством контакта с насекомыми. Туберкулез представляет собой достаточно специфическое инфекционное заболевание, очаг которого в тканях любого человека может находиться на протяжении многих лет, а выход распространения найти в течение нескольких недель. Именно потому сдавать анализы крови либо мочи на выявление туберкулеза стоит наряду с основными исследованиями.

Современный метод постановки диагноза: ПЦР-диагностика

Подобрать оптимальные варианты лечения туберкулеза довольно сложно. Основная причина затруднительного излечивания состоит в поздних сроках обнаружения инфекционного заражения. Диагностика ПЦР методикой представляет собой современный способ выявления очагов микобактерий в мизерном составе, когда сама болезнь еще не подала признаки присутствия. То есть до первых симптомов проявления туберкулеза, а особо до достижения состояния переносчика, допустимо диагностировать и излечить инфекцию.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) методика исследования лабораторным способом определения ДНК микобактерий, основанная на генетик-биологическом материале. В основе действия стоит особый фермент – полимераза, отвечающая за синтез молекул ДНК.

Применение полимеразы в исследовательских целях на небольших фрагментах биологического материала, выявляет ДНК бактерий существующих в минимальных количествах. Размножение ДНК молекул дает необходимый объем материала для исследований и определения типа бактерий, и ее функциональную принадлежность к определенному штамму туберкулеза.

Диагностика туберкулеза посредством полимеразной цепной реакции выдает фактически 100% результаты, что относит методику к наиболее достоверным способам выявления заболеваний бактериального и инфекционного типа. Не исключено, что в будущем пробу Манту и другие методы диагностирования для определения микобактерии туберкулеза, полностью сменит ПЦР-методика.

Примечательно, что анализ ПЦР является достаточно специфичным. Поясняется фактор тем, что при исследовании биологического материала на признак туберкулеза, диагностика вполне может выявить и другие типы инфекций, либо опровергает наличие таковых в легких.

Необходимость в диагностике методом ПЦР

Симптоматика проистекания такого заболевания, как туберкулез, весьма спорна. Например, у детей болезнь протекает без особых явных симптомов, как и в случае заражением иного рода бактериальной инфекцией. По сути, треть всего населения проживающего на планете заражены туберкулезом и являются носителями инфекции.

Существует несколько форм заболеваний:

• первичная – является ранней стадией;
• латентная – скрытая форма болезни, не является заразной;
• активная – заразная открытая форма заболевания;
• вторичная – имеет свойство распространяться через кровь по всему организму.

Специалисты не дают направление на ПЦР на туберкулез абсолютно всем пациентам, что проходят обследования. Причина тому дороговизна оборудования для поликлиник государственного значения, и высокая стоимость анализа в частных лабораториях.