Тест т-спот для диагностики туберкулеза

Универсальный альтернативный вариант иммунологического исследования in vitro диагностики туберкулезного процесса путем количественного определения мононуклеарных клеток периферической крови, продуцирующих ИФН-γ в ответ на присутствие белков CFP-10 и ESAT-6 M. tuberculosis.

Иммунологический тест на туберкулез

Синонимы английские

Testing for tuberculosis infection

Прямая оценка функции T-клеток энзим-связывающий иммуноспотингом (ELISPOT).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.

Общая информация об исследовании

Возбудителем туберкулёза является микобактерия туберкулеза (МБТ, палочка Коха, Mycobacterium tuberculosis) – высокоустойчивый микроорганизм. В настоящее время описано около 150 видов микобактерий, но клинически значимыми признаны М. tuberculosis (более 90 % всех случаев туберкулезной инфекции), М. bovis (5 %) и М. africanum (около 3 % – главным образом среди населения стран тропической Африки).

Источником инфекции являются больные люди и животные. Наиболее распространен воздушно-капельный путь заражения, при котором возбудитель проникает в организм через верхние дыхательные пути, иногда через слизистые оболочки пищеварительного тракта или через поврежденную кожу.

Попадая в окружающую среду, возбудитель способен длительно сохраняться: в высохшей мокроте он выживают до 10 месяцев, на предметах, окружающих больного (белье, книги), – более 3 месяцев, в воде – более года, в почве – до 6 месяцев.

В настоящее время описаны следующие варианты развития ситуации после проникновения МБТ в организм человека: [1]

• полная элиминация (удаление) возбудителя из организма;
• развитие первичного туберкулеза (при быстром росте и размножении МБТ);
• инфицирование, или «латентная туберкулезная инфекция» (ЛТИ), [2] – состояние стойкого иммунного ответа на антигены МБТ при отсутствии клинических проявлений активной формы туберкулеза.

Присутствующий в организме возбудитель способен не только длительно бессимптомно персистировать в организме, но при определенных обстоятельствах (интенсивное размножение МБТ на фоне малоэффективного иммунитета и т.д.) реактивироваться и вызвать развитие заболевания. В настоящее время установлено, что с момента инфицирования МБТ в течение первого года заболевание развивается у 5 % инфицированных людей, в течение всей оставшейся жизни туберкулез развивается еще у 5 %, то есть пожизненный риск заболевания туберкулезом среди инфицированных составляет 10 %.

Вместе с тем наличие различных факторов может способствовать повышению риска развития локального туберкулеза: так, при ВИЧ-инфицировании ежегодный риск заболевания туберкулезом на фоне ЛТИ составляет 10 %, а пожизненный риск – 50 %.

Диагностика туберкулеза является комплексной и включает, согласно регламентирующим документам, [3] аллергические внутрикожные пробы (реакция Манту и «Диаскинтест»), инструментальное обследование (ФЛГ, рентген) и лабораторные – направленные как на выявление и идентификацию возбудителя с определением спектра его чувствительности к препаратам этиотропной терапии, так и на изучение выраженности иммунологической реакции на патоген.

Одним из современных и высокоинформативных методов определения специфической иммунной реакции на МБТ, особенно при отсутствии или минимальных клинико-инструментальных признаках инфекции и сомнительных результатах общепринятых методов лабораторной диагностики туберкулеза, является тест T-SPOT.

Исследование иммунного Т-клеточно-опосредованного ответа: количественное определение в крови эффекторных Т-клеток (CD4 и CD8), вырабатывающих ИФН-ɣ (гамма-интерферон), который продуцируется в ответ на стимуляцию специально подобранными антигенами ESAT-6 и CFP10. Эти белки входят в состав клинически значимых МБТ (М. tuberculosis, М. bovis, М. africanum) и отсутствуют у бактерий, используемых при производстве вакцины БЦЖ и у непатогенных для человека микобактерий.

Преимущества теста Т- SPOT:

• высокая специфичность и чувствительность метода (87-97 %);
• безопасность, отсутствие побочных реакций;
• отсутствие ложноположительных результатов;
• результат исследования не зависит от наличия вакцинации БЦЖ;
• не имеет противопоказаний и ограничений по времени проведения;
• позволяет диагностировать внелегочные формы туберкулеза;
• позволяет диагностировать инфекцию у пациентов с ВИЧ и низкими показателями уровня CD4. [4]

Для чего используется исследование?

• Диагностика туберкулезной инфекции.

Когда назначается исследование?

• Пациентам, у которых в связи с основным заболеванием (эпилепсия, хронические заболевания в стадии обострения и др.) затруднено проведение внутрикожных тестов.
• При наличии в анамнезе пациента токсико-аллергических реакций на туберкулин.
• Детям, привитым БЦЖ, у которых выявлена ложноположительная реакция Манту, – до проведения инструментального обследования легких. [5]
• По эпидемиологическим показаниям – пациентам, прибывшим из стран с высоким уровнем заболеваемости туберкулезом (Африка, Азия) и/или находившимся в контакте с лицами с диагностированным заболеванием.
• Пациентам с аутоиммунными и др. заболеваниями (силикоз), ведущими к снижению системного иммунитета.
• Пациентам, получающим системное лечение глюкокортикоидами или иммуносупрессивную терапию.
• Онкологическим пациентам, получающим лучевую и химиотерапию.
• Пациентам на диализе или готовящимся к трансплантации органов или переливанию крови.
• ВИЧ-инфицированным, особенно со снижением количества СD4-клеток.
• При подозрении на внелегочные формы туберкулеза.

Для диагностики туберкулеза наряду с Диаскинтестом и пробой Манту предлагается использовать иммуноферментные гамма-интерфероновые тесты, одним из которых является T-SPOT.TB. Этот метод диагностики во многом похож на квантифероновый тест, для его проведения так же необходима кровь из вены.

На сегодняшний день квантифироновый тест на территории Российской Федерации для выявления туберкулеза не используют. Вместо него предлагают английский аналог — Интерфероновый тест (Т-СПОТ или T-SPOT.TB).

В апереле 2014 года в Российской Федерации был зарегистрирован набор реагентов для in vitro диагностики туберкулезной инфекции Т-СПОТ.ТБ (T-SPOT®.TB). Получено регистрационное удостоверение № ФСЗ 2012/12648 Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения. Регистрационное удостоверение подтверждает, что Т-СПОТ является изделием медицинского назначения, и дает право на применение в Российской Федерации.

Что означает T-SPOT.TB

Данный анализ может применяться для всех людей, находящихся в группе риска по латентной туберкулезной инфекции, а также для лиц с подозрением на туберкулез вне зависимости от их возраста, пола, иммунного статуса и терапии.

Плюсы (преимущества) T-SPOT.TB теста:

• высокая специфичность и высокая чувствительность;
• отсутствие противопоказаний для исследования;
• безопасность и отсутствие побочных реакций;
• отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
• интерпретация результатов теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых проб;
• возможно применять для дифференцирования туберкулезной инфекции у детей от поствакцинальной аллергии, а также для оценки уровня специфического иммунитета в процессе лечения.

Кому показан Т-СПОТ

T-SPOT может быть использован вместо пробы Манту или Диаскинтеста во всех случаях, когда показано проведение кожных проб в качестве теста для диагностики туберкулеза. В качестве дополнительного метода исследования для подтверждения или опровержения сомнительных результатов кожных тестов. И особенно тест показан тем лицам, у которых имеются противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:

• индивидуальная непереносимость туберкулина;
• кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
• дети, подростки и взрослые с высоким риском развития аллергической реакции;
• инфекционные заболевания в период обострения;
• васкулиты;
• эпилепсия.

Анализ Т-СПОТ. Метод проведения исследования

Для диагностики туберкулеза с помощью Т-СПОТ теста берут анализ крови в количестве от 2 до 8 мл в зависимости от возраста:

• Дети в возрасте до 2 лет — 2 мл;
• Дети в возрасте от 2 до 9 лет — 4 мл;
• Взрослые и дети в возрасте 10 лет и старше — 8 мл.

Для исследования берется венозная кровь утром натощак (или не менее чем через 2-4 часа после последнего приема пищи).

Обследование проводится при наличии информированного согласия законных представителей несовершеннолетних детей.

Результат Т-СПОТ

Результат Т-СПОТ теста может быть:

• отрицательным, если в организме туберкулез отсутствует;
• положительным, если организм инфицирован туберкулёзом;
• сомнительным (неопределенным), если тест не дает однозначного ответа.

Отрицательные результаты тестов при отсутствии клинических симптомов заболевания позволяют врачу фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза.

Т-СПОТ — сомнительный результат:
В редких случаях результаты теста не могут быть интерпретированы вследствие не прохождения положительного контроля теста и оцениваются как неопределенные. В этом случае нельзя не подтвердить, не исключить туберкулезную инфекцию.

Т-СПОТ.ТБ (Т-SPOT®.ТВ) следует применять и интерпретировать только совместно с общей клинической картиной. Отрицательный Т-СПОТ не исключает возможности инфицирования М. tuberculosis.

Сравнение тестов для диагностики туберкулеза

Где можно сделать T-SPOT в Москве

Иммунологический тест in vitro (в пробирке) T-SPOT проводится как альтернативный метод, который не входит в программу государственных гарантий по организации бесплатной медицинской помощи гражданам и проводится на платной основе.

Возбудителем такого опасного заболевания как туберкулез являются кислотоустойчивые микобактерии, которые характеризуются особой агрессивностью. Туберкулезная микобактерия может поддерживать жизнеспособность длительное время даже в неблагоприятных условиях (на поверхности предметов, в высушенной бронхиальной слизи, а также в почве).Вероятность развития заболевания как у взрослых, так и у детей достаточно высока. Это объясняется сниженной иммунной защитой организма и наличием сопутствующих заболеваний.

Основной способ передачи заболевания – воздушно-капельный. Инфицирование происходит даже при вдыхании незначительного количества возбудителей туберкулеза. Риск заражения существует также при контакте с инфицированными предметами и продуктами.

Симптомы туберкулеза

Необходимость проведения комплексного обследования организма возникает при наличии следующих симптомов:

• Продолжительный кашель с выделением слизи с примесями крови (дольше 3 недель)
• Болезненные ощущения за грудиной
• Наличие субфебрильной температуры
• Чрезмерная потливость (особенно ночью)
• Вялость.

По данным многочисленных исследований приблизительно треть населения инфицирована туберкулезной микобактерией, но само заболевание протекает в латентной форме. Стоит отметить, что такие пациенты не заразны. Вероятность перехода заболевания в активную форму очень низок и составляет около 10%. Несмотря на это, лица со сниженной иммунной защитой (ВИЧ-инфицированные, больные сахарным диабетом, курящие, дети) подвергаются высокому риску возникновения данного недуга.

Методы диагностики

Зачастую при латентном туберкулезе рентген-снимок не определяет какие-либо изменения в легких. Основными методами диагностики такой формы ранее являлись именно кожные тесты (Диаскинтест или же пр. Манту). Но стоит отметить, что такие методы выявления туберкулезной инфекции имеют перечень противопоказаний:

• Острое или хроническое течение инфекционных недугов
• Соматические болезни во время обострения
• Эпилепсия
• Аллергия.

T-SPOT.TB – эффективный способ диагностики туберкулезной инфекции

T-SPOT.TB – иммунологический способ выявления туберкулеза, как у детей, так и у взрослых, рекомендованный Российским обществом фтизиатров.

Данный метод имеет сложную аббревиатуру и расшифровывается так:

Применение методики под названием Т-СПОТ в России утверждено с 2012 г.

Методика выявления носительства туберкулеза Т-СПОТ достаточно информативна. Применение теста пот помогает исключить ложнопозитивную реакцию на микобактерии туберкулеза даже в тех случаях, когда другие методы показывают ошибочный позитивный результат. Чувствительность теста T-SPOT.ТВ в различных странах оценивается на уровне 98%.

За счет чего T-SPOT является высокоинформативным тестом

T-SPOT.TB – это in vitro исследование, которое основано на определении производства лимфоцитами γ -интерферона под воздействием определенных антигенов (CFP-10, а также ESAT-6). Такой тест пот позволяет определить количество Т-клеток, которые отвечают на воздействие ESAT-6 и CFP10. Данные антигены не могут определяться в штаммах БЦЖ, а также у представителей нетуберкулезных микобактерий. Во время диагностики у инфицированных пациентов в крови выявляются Т-лимфоциты, которые распознают те или другие виды антигенов.

Благодаря этому T-SPOT.ТВ стал наиболее информативным способом диагностики как латентной, так и активной формы туберкулеза. Высокий показатель точности теста пот позволяет исключить проведение дополнительных анализов, а также вредных лечебных процедур.

Основные преимущества теста T-SPOT над кожными пробами

Такая диагностика имеет ряд преимуществ по сравнению с проводимыми ранее кожными пробами, а именно:

• Специфичность
• Повышенная восприимчивость
• Полное отсутствие противопоказаний к дальнейшему проведению
• Безвредность
• Отсутствие временных ограничений в проведении
• Не показывает ложноположительный результат при БЦЖ
• Быстрое получение результатов исследования.

Когда лучше применять метод Т-СПОТ

Применение теста пот для диагностики туберкулеза рекомендуется данной группе пациентов:

• Детям при имеющихся противопоказаниях к осуществлению кожных проб на туберкулез (аллергия, кожные болезни, острое или хроническое течение недугов, эпилепсия)
• Детям при токсико-аллергической реакции на вещество туберкулин
• Дошкольникам или школьникам, которые привиты БЦЖ при ложноположительной реакции на Манту
• Лицам, которые находились в странах с повышенным показателем инфицирования туберкулезной микобактерией (к примеру, Африка и Азия)
• Беременным при контакте с инфицированными туберкулезом пациентами или же при наличии характерных признаков болезни
• Лицам, контактирующим с пациентами, у которых диагностирован туберкулез
• ВИЧ-инфицированным
• Лицам, у которых подозревается внелегочная форма заболевания
• Дошкольникам или школьникам, родители которых отказались от проведения кожных тестов
• Лицам, получавшим терапию антителами против ФНО.

Расшифровка анализа Т-СПОТ.ТБ

Результаты проводимого иммунологического исследования могут показать три варианта ответа:

• Негативный – пациент не инфицирован туберкулезной микобактерией
• Позитивный – пациент инфицирован туберкулезом
• Сомнительный – требуется повторное проведение теста или же дополнительная диагностика (к примеру, антитела к туберкулезу, ПЦР).

О результатах теста Т-СПОТ лучше всего узнать на приеме у фтизиатра, он подробно расскажет пациенту о проводимом исследовании и дальнейших действиях.