Пцр анализ на туберкулез вместо манту

ПЦР на туберкулез проводится в тех случаях, когда нет возможности сделать пробу Манту. Метод диагностики является одним из основных способов установления наличия антител или частичек ДНК вируса. Но о взаимозаменяемости исследований продолжаются споры, так как методы имеют различную цель.

Особенности ПЦР

Туберкулез – опасное вирусное заболевание, которое характеризуется поражением легких. Патология может протекать скрытно на начальных этапах и для диагностики используются различные методы. Основным из них является лабораторное исследование, позволяющее выявить наличие клеток вируса. С целью диагностики заболевания проводится проба Манту. Но в некоторых случаях у детей могут возникать определенные осложнения. Также анализ не всегда бывает точным. В результате требуется проведение более эффективного исследования.

Одним из подобных лабораторных исследований является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Метод достаточно эффективен и высокочувствителен. Результаты можно будет получить уже спустя 1-2 дня. В отличие от него, более распространенный культуральный способ установления заболевания занимает около 6 недель. За этот период времени патологический процесс распространятся на большие участки, возрастает риск развития осложнений.

ПЦР имеет ряд преимуществ перед пробой Манту. Но это не является свидетельством того, что данный метод может быть использован для выявления антител туберкулеза.Полимеразная реакция имеет свои особенности и позволяет установить наличие антител в организме или частичек ДНК. Метод успешно применяется в случаях, когда вирус туберкулеза уже поразил клетки, но иммунитет не выработал антигенов к ним. Преимуществом метода также является возможность установления количества микроорганизмов, ставших причиной развития заболевания.

ПЦР перед пробой Манту имеет еще одну отличительную особенность. Способ диагностики позволяет выявить внелегочную форму патологии. Использование ПЦР также оправдано в тех случаях, когда нужно установить не только наличие вируса туберкулеза, но и источник заражения. Это необходимо тем, кто уже перенес заболевание. Так как повторное развитие наблюдается спустя год после окончания периода реабилитации. Анализ крови на туберкулез также незаменим пациентам, у которых установлен иммунодефицит или с целью уточнения установленного диагноза при сильном поражении легких.

Как проводится

ПЦР анализ проводится с помощью забора биологической жидкости человека. Чаще всего используется кровь. Но также могут быть использованы:

Перед процедурой специалист подготавливает предметное стекло, нанося на его поверхность специальный раствор для предотвращения свертываемости крови. Затем обрабатывает место прокола на пальце с помощью ватного тампона, смоченного в спиртовом растворе.

Первую каплю крови убирают ватой, а остальную в нужном количестве набирают в пробирку. Место прокола снова обрабатывают с помощь ватки и спиртового раствора.

Затем специалист наносит на предметное стекло небольшое количество крови. И направляет анализ в лабораторию. Там клетки отделяют от плазмы и рассматривают материал под микроскопом с целью выявления наличия возбудителя.

Заключительный этап процедуры проводится для выявления наличия туберкулеза. Для этого к осадочному составу добавляют специальные вещества, которые создают нужную температуру. В результате получается обновленный ДНК-материал.

Данная методика диагностирования позволяет выявить туберкулез и определить верную методику терапии. Анализ проводится как детям, так и взрослым и незаменим для быстрого выявления заболевания. На основе результатов удается установить источник заражения. ПЦР проводится вместо пробы Манту в экстренных случаях, когда у врача появляются подозрения на значительное поражение легких.

Возможна ли взаимозаменяемость методов

ПЦР и проба Манту ребенку проводят для различных целей и по поводу их взаимозаменяемости ученые до сих пор ведут споры.

Ведь микроорганизмы могут находиться в клетках. В этом случае анализ ПЦР не будет эффективен и даст отрицательный результат.

Полимеразная реакция может дать и ложноположительные результаты. Это происходит в 10% всех случаев.

Поэтому многие врачи придерживаются мнения, что ПЦР на туберкулез не может быть использована вместо пробы Манту. Несмотря на то, что метод имеет множество преимуществ, он не может определить наличие вируса в клетках организма. В этом случае результат будет отрицательным. Но лабораторное исследование используется в тех случаях, когда требуется срочная диагностика патологии.

Туберкулез социально опасное заболевание. Широкое распространение среди людей всех возрастов делает необходимым проведение скрининговых (быстрых и дешевых) обследований на это заболевание. Тест, который многие годы использовался для определения этого заболевания – это проба Манту. Тест является диагностическим выбором для максимального охвата населения. Отличается простотой проведения, дешевизной и достаточно высокой информативностью. Особенно активно ее применяют в детских коллективах. Однако, при ее проверке возможна фиксация ложноположительных результатов, поэтому и на смену этой пробе пришел новый ПЦР анализ. Для его проведения нужно сдавать кровь на туберкулез. Анализ крови на туберкулез вместо Манту называется полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Общие сведения о Манту

Манту – это проба, которую проводят с помощью подкожного введения малых дозировок туберкулина для проверки наличия у человека заболевания туберкулез или же предрасположенности к нему. Туберкулином называется антиген-вытяжка из бактерий туберкулеза. То есть проба Манту — это анализ на антитела к туберкулезу.

Чаще всего данную пробу проводят, чтобы проверить есть ли туберкулез у детей дошкольного и школьного возрастов.

Это исследование не является прививкой, как думают многие, так как она не создает иммунитет организма к бактериям туберкулеза, а проверяют его наличие. После проведения в месте прокола проявляется припухлость. По прошествии 3 дней результат анализируется. При этом специалист осматривает место прокола, оценивает характер уплотнения: цвет, размер и рисунок. Важно, чтобы человек соблюдал определенные правила ухода в эти дни. Самым важным является то, что уплотнение нельзя мочить и т.д.

Если уплотнение от 4 до 16 мм, то это считается нормой. Показатель при туберкулезе легких – это 17 мм и больше. Но уже доказано, что часто проявляются ложные результаты. Поэтому все популярнее стает ПЦР анализ вместо Манту. Иногда назначают совместную диагностику, то есть нужно сдавать кровь после Манту.

ПЦР диагностика

Сегодня во многих клиниках можно пройти анализ крови на туберкулез вместо манту. Что это такое? Исследование называется ПЦР – полимеразная цепная реакция, оно является высокочувствительным. Это обусловлено тем, что с его помощью можно выявить даже 1-2 микробактерии возбудителя. Достоверность ПЦР очень высокая– в 98% происходит выявление патологических клеток. Поэтому ученые считают полимеразную цепную реакцию важным открытием в микробиологической науке за последнее время. ПЦР диагностика — это метод выбора Всемирной организации здравоохранения при туберкулезе.

Диагностика ПЦР на туберкулез эффективна и при контроле качества лечения, так как с помощью исследования врач может определить устойчивость бактерий к лекарствам. Устойчивость к лекарственным препаратам при лечении является очень серьезной проблемой, она снижает эффективность лечения в разы, поэтому так важно для врача-фтизиатра знать о ней у конкретного пациента. Это помогает правильно определить тактику лечения.

Также анализ крови на туберкулез просто необходим для людей, которые уже перенесли это заболевание, для выявления рецидивов. Исследование дает возможность диагностировать рецидив на раннем этапе, что позволяет вовремя начать лечение и предупредить развитие серьезных осложнений. Свою эффективность анализ на туберкулез доказал и в тех случаях, когда его локализация внелегочная.

К анализу крови ПЦР, так же как и к иммуноферментному исследованию не нужны особые подготовки. Иногда требуется перед исследованием отменить на некоторое время прием определенных лекарств. Об этом предупредит лечащий врач, который и направит на исследование.

Никаких возрастных ограничений для проведения исследования на микробактерии туберкулеза нет. Анализ крови ПЦР делают взрослым и детям. Так как он абсолютно безопасен. Но все же в школах и садиках чаще детям делают пробу Манту, а ПРЦ диагностику больше используют для взрослых людей. Особенно для тех, у кого ранее был туберкулез.

Сдать свою кровь на туберкулез можно в специализированной лаборатории. Кровь при анализе на туберкулез собирается в пробирку с веществом, которое не дает ей сворачиваться. Важно соблюдать все условия стерильности, а также запрещено взбалтывать пробирки с кровью на туберкулез при анализе, так как будет затруднен процесс отделения ее клеток от плазмы.

Далее происходит лабораторный процесс, при котором отделяется плазма от клеток, и лаборант через микроскоп определяет есть ли клетки возбудителя в биологическом материале. Заключительный этап исследования основывается на создании определенных условий для клеток. То есть в осадочный материал добавляются вещества, которые спровоцируют реакцию, также при этом должны быть определенные температурные показатели. Таким веществом является фермент транскриптаза. В результате этих действий получается обновленный материал ДНК, который должен расшифровываться специалистом. После этих действий лаборант может дать точное заключение о наличии или отсутствии туберкулеза у человека.

Биологическим материалом для приведения анализа ПЦР может быть, как кровь, так и моча. Для проведения анализа мочи на ПЦР необходима утренняя порция в количестве 20-30 мл. Для проведения исследования крови потребуется 1 мл венозной крови.

Расшифровки анализов ПЦР можно получить в довольно короткий срок – 1-2 дня. А в некоторых случаях его проводят всего за 4-5 часов. Это уместно если результаты нужны срочно, перед экстренной операцией и т.д.

ПЦР расшифровка может быть простой и сложной. В первом случае результат будет отрицательным и никаких патологических клеток обнаружено не будет, или же их будет очень мало. Сложная ПЦР расшифровка нужна при высоком содержании клеток, так как при этом необходимы точные расчеты. Есть определенные нормы, по которым квалифицированный специалист расшифровывает анализ крови на туберкулез. При этом он может диагностировать стадию и причины заболевания.

Недостатки методов Манту и ПЦР

Проба Манту – это процедура, для проведения которой должны быть соблюдены определенные условия, так как есть ряд противопоказаний. Ее запрещено проводить детям в таких случаях:

Если в данный момент у ребенка есть хронические заболевания, которое обострились;
На теле есть какие-либо высыпки, кожные заболевания;
Аллергические реакции любого проявления;
Эпилепсия.

Если провести исследование в этих случаях, то реакция может быть разной, и даже непредсказуемой. Также иногда есть индивидуальная хроническая несовместимость, при этом сдавать кровь на ПЦР – это оптимальная альтернатива Манту.

Главным отличием пробы Манту от анализа ПЦР является то, что у человека может развиться аллергическая реакция и другие осложнения после введения антигена вплоть до анафилактического шока, а анализ крови абсолютно безвреден.

Особых недостатков анализа на микробактерии нет. Но все же специалисты отмечают, что не всегда отрицательные результаты ПЦР исследования является 100% гарантией отсутствия заболевания. Также ПЦР не всегда назначают людям с тяжелым поражением легких, так как в некоторых случаях диагноз не определяется. Малоэффективным анализ крови при туберкулезе будет у больных с иммунодефицитами разных типов.

Вывод

Можно сделать вывод, что новый метод диагностики — полимеразная цепная реакция является более информативным и безопасным, чем проба Манту, которая уже многие годы используется в медицинской практике. Не смотря на то, что новое исследование дороже и более трудоемкое при проведении, его информативность выше, поэтому оно более оправдано для диагностики.

Кто сказал, что вылечить туберкулез невозможно?

Если лечение врачей не помогает полностью избавиться от туберкулеза. Таблеток приходится пить все больше. К туберкулезу присоединились осложнения от антибиотиков, а результата нет. Узнайте, как наши читатели победили туберкулез. Читать статью >>

Полезное

Лучший подарок для мужчин на 23 февраля это приманка(активатор клёва) для рыбалки Fish Drive. Прочтите отзыв Андрея Захарова известного эксперта в спортивной рыбалке. Читать далее

Лабораторная диагностика туберкулеза у детей имеет важное значение. При помощи исследований проводится верификация возбудителей инфекционного процесса, определяется выраженность функциональных изменений в организме, включая органы дыхательной системы. В детском возрасте назначаются различные диагностические методики, к которым относятся клинический, биохимический анализы крови, микробиологический посев, серологическое обследование, Т-СПОТ тест, ПЦР.

Лабораторные тесты

Клинический анализ крови при туберкулезе у детей – материал берется из пальца, проводится определение уровня гемоглобина, количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, а также подсчет лейкоцитарной формулы (процентное отношение различных видов лейкоцитов к их общему количеству). Независимо от формы заболевания и локализации инфекционного процесса назначается анализ крови при туберкулезе. Показатели у детей даже в норме отличаются, что связано с возрастными особенностями функционального состояния различных органов и систем.
Биохимический анализ – кровь в количестве 5-10 мл берется из локтевой вены, в ней определяется концентрация различных соединений и ферментов, изменение концентрации которых указывает на нарушение функционального состояния печени (АЛТ, АСТ, креатинфосфокиназа, лактатдегидрогеназа, общий билирубин и его фракции), почек (остаточный азот, мочевина, мочевая кислота), изменение метаболизма липидов (триглицеридиды, различные классы липопротеидов) и углеводов (глюкоза).
Общий анализ мочи включает определение нескольких показателей, которые прямо или косвенно указывают на функциональные изменения в почках и мочевыводящих путях. К макроскопическим показателям относятся объем, цвет, запах мочи, наличие видимых патологических примесей (прожилки крови, гноя, слизи). Исследование включает определение концентрации белка, глюкозы, а также микроскопию осадка с выявлением и подсчетом количества лейкоцитов, эритроцитов, кристаллов солей, цилиндров, бактерий.

Лабораторные исследования неспецифичны, не дают возможности верифицировать возбудителя. При помощи этих анализов врач может оценить состояние различных органов, наличие и выраженность изменений, спровоцированных патологическим процессом.

Микробиологическое исследование

Микробиологическое исследование проводится с целью выявления и идентификации микобактерий туберкулеза в биологическом материале. Для изучения преимущественно берется мокрота, которая отхаркивается из бронхов во время кашля. Анализ включает несколько методик:

Микроскопия – из биологического материала готовится мазок, который окрашивается специальными красителями. Под микроскопом врач-лаборант выявляет палочки туберкулеза. Современным и более чувствительным вариантом является микроскопия после обработки люминесцентным красителем, меченным антителами к возбудителю.
Бактериологический посев – биологический материал наносится на специальные питательные среды. При наличии возбудителя через определенный промежуток времени на них вырастают колонии микроорганизмов, которые идентифицируются по морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам. Методика дает возможность определять чувствительность выделенных микобактерий к современным противотуберкулезным препаратам.

Для получения достоверного результата важно правильно собрать мокроту, с соблюдением следующих рекомендаций:

собирают материал каждое утро в течение трех дней (получают 3 порции);
процедуру выполняют в отдельной комнате;
ребенок делает глубокий вдох несколько раз, что провоцирует кашель;
после нескольких кашлевых толчков в рот попадает мокрота, которую ребенок сплевывает в специальную посуду.

У детей выделяется небольшое количество этой жидкости. Сбор материала затруднен, очень часто происходит рефлекторное заглатывание мокроты, которая попала в полость рта во время кашля. Поэтому для микробиологического исследования может использоваться плевральный выпот, промывные воды желудка, бронхов, спинномозговая жидкость (ликвор).

Серологические методы

Серологическое исследование подразумевает выявление в крови ребенка специфических антител, формирующихся клетками иммунной системы в ответ на прогрессирование туберкулезного процесса. В крови определяют несколько классов антител:

IgA – показатель активности местного иммунитета слизистых оболочек.
IgM – повышение активности антител указывает на недавнее инфицирование ребенка.
IgG – показатель длительного течения инфекционного процесса.

Развернутое исследование позволяет не только выявить соответствующие антитела, но также определить их титр. Для быстрой диагностики разработаны экспресс-тесты, которые отображают только факт наличия иммуноглобулинов без определения их концентрации.

Тест СПОТ

Анализ крови на туберкулез вместо пробы Манту ребенку называется спот-тестом (официальное название – T-SPOT.TB). Он представляет собой иммунобиологическое исследование. Суть заключается в определении реакции Т-лимфоцитов на определенные пептиды, которые входят в состав клеточной стенки микобактерий туберкулеза. Для этого у ребенка берут кровь из вены. В лаборатории под микроскопом в нее добавляют специальные реагенты, после чего исследуют реакцию Т-лимфоцитов.

В отличие от других методик лабораторной диагностики тест спот на туберкулез детям отличается высокой достоверностью и специфичностью. Исследование назначается для выявления носительства туберкулезной палочки у детей, которым была сделана прививка БЦЖ.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

ПЦР на туберкулез детям назначается для выявления и идентификации генетического материала возбудителя в различных биологических средах. Исследование отличается высокой специфичностью и чувствительностью. Для получения положительного результата достаточно присутствия нескольких клеток возбудителя, при этом вероятность получения недостоверной информации остается очень низкой. Суть исследования заключается в проведении множественной ферментативной реакции, в результате которой происходит накопление соответствующего генетического материала.

Заключение

Диагностика туберкулеза у детей преследует несколько целей. При помощи современных исследований лечащий врач определяет вид возбудителя, характер и степень тяжести патологического процесса. На основании результатов анализов он может подобрать адекватное лечение и проконтролировать его эффективность.